Preferiranje dijagnostike

Preferiranje dijagnostike nudi mogućnost genetskog ispitivanja ženskih jajnih stanica u sklopu in vitro oplodnje (IVF). Ispitivanja se provode na kromosomima 1. i 2. polarnog tijela, koji nastaju tijekom 1. i 2. mejoze nakon što se muška sperma unese u jajnu ćeliju. Prednost ove metode je u tome što nije pred-implantacijska dijagnoza (PGD), jer se ispitivanje obavi prije spajanja ženskog i muškog jezgra, tako da je dijagnoza favortizacije dozvoljena u nekim zemljama u kojima je PGD zabranjen.

Što je dijagnosticiranje preferiranja?

Dijagnostika preferiranja omogućava otkrivanje kromosomskih aberacija u haploidnom genomu jajašca u okviru in vitro oplodnje (IVF). Povrh toga se mogu otkriti numerička odstupanja određenih kromosoma (aneuploidija) i abnormalnosti određenih gena koji uzrokuju nasljedne bolesti. Kada se muška sperma unese u citoplazmu jajne stanice tijekom IVF-a, aktivira se prva i druga mejoza (mejoza I i II) jajeta.

Podjelom se stvaraju dvije "suvišne" stanice, polarna tijela, koja imaju isti skup kromosoma kao i sama jajna stanica. Polarna tijela, koja bi se tijelom obično razgradila, uklanjaju se polarnom biopsijom tijela za ispitivanje kromosoma. Budući da se dijagnoza prefetilizacije uvijek provodi na polarnim tijelima, postupak se naziva i dijagnoza polarnog tijela (PKD). Prednost metode ispitivanja je u tome što se može provesti i u nekim zemljama u kojima je zabranjena predimplantacijska dijagnoza (PGD), jer se ispitivanje provodi na genomu jajne stanice kada se stanične jezgre spermatozoida i jajne stanice još nisu spojile zajedno.

Nedostatak je taj što se mogu ispitivati ​​samo kromosomske aberacije majčinog genoma. Hromosomi sperme koji su uneseni u citoplazmu jajeta ne mogu se detektirati ovom metodom. Bolesti povezane s Y ne mogu se prepoznati jer skup haploidnih kromosoma jajne stanice ne može sadržavati Y-kromosom.

Funkcija, učinak i ciljevi

Kao dio dijagnoze pred oplodnju u obliku genetskog polarnog pregleda tijela, numeričke anomalije (aneuploidija) mogu se otkriti u određenim kromosomima materinskog genoma, kao i translokacije u kojima su segmenti kromosoma razdvojeni i ponovno integrirani na pogrešnom mjestu. Pored toga, mogu se dijagnosticirati mutirane genske mutacije koje se nasljeđuju od majke i temelje se na mutaciji jednog gena (monogenska bolest). Ovo pretpostavlja da mora biti poznata potencijalna nasljedna bolest kako bi se mogao posebno ispitivati ​​određeni gen na X kromosomu.

U slučaju recesivnog nasljeđivanja, postoji vjerojatnost da X kromosom polarnog tijela - a time i X kromosom oplođene jajne stanice, sadrži zdravi alel odgovarajućeg gena. Sam postupak uključuje popsiju polarnog tijela u kojoj se dva haploidna polarna tijela uklanjaju iz jajne stanice, a kromosomi se tada podvrgavaju FISH testu (fluorescencija in situ hibridizacija). Biopsija polarnih tijela ogroman je izazov za laboratorij koji izvodi posao jer identifikacija i izolacija polarnih tijela zahtijeva određeno iskustvo. Za postupak FISH ispitivanja dostupne su takozvane DNK probe za odabrane kromosome koji se povezuju s odgovarajućim haploidnim kromosomima jer imaju komplementarni niz aminokiselina.

DNA sonde su označene različitim fluorescentnim bojama, tako da se kromosomi mogu prepoznati uz pomoć posebnog softvera i automatski prebrojati. Većina kromosomskih aberacija, poput aneuploidija i pomaka kromosoma unutar kromosoma, fatalna je. To znači da IVF ili ne formira zigotu, ili da se zametak odbacuje nakon što je transplantiran u maternicu, ili da dođe do ranog ili kasnijeg pobačaja. Budući da se učestalost kromosomskih aberacija u jajnim stanicama žena povećava s godinama, važan cilj dijagnosticiranja favoritizacije je pozitivan odabir oplođenih jajašaca. Natrag u maternicu se transplantiraju samo oplođena jajašca s netaknutim genomom - ako su prepoznatljiva.

Pozitivan izbor trebao bi povećati stopu trudnoće nakon IVF-a i smanjiti stopu odbačenih oplođenih jajašaca i broj pobačaja. Drugi je cilj isključiti nasljedne bolesti temeljene na kromosomskim aberacijama ili određenim genetskim oštećenjima na ponovnom oplođenom oplođenom jajetu pozitivnim odabirom oplođenih jajašaca. Tipične nasljedne bolesti koje se testom mogu isključiti su cistična fibroza, atrofija mišića kralježnice i anemija srpastih stanica.

Rizici, nuspojave i opasnosti

Dijagnostika preferiranja provodi se izvan tijela i stoga ne uključuje nikakve dodatne fizičke rizike za dotičnu ženu. Postoji samo mali rizik od tjelesnih ozljeda i infekcija povezanih s uklanjanjem jajašaca. Za razliku od PGD-a, koji uključuje i pregled kromosoma pomoću FISH testa, dijagnoza prije oplodnje može pregledati samo kromosom i genetski materijal od majke.

To znači da negativan FISH test u kojem nisu dijagnosticirane kromosomske ili genetske aberacije može kod roditelja pobuditi pretjerano pozitivna očekivanja u pogledu tijeka trudnoće i kasnijeg poroda. Kromosomske aberacije očinskog genoma i moguće postojeće anomalije Y kromosoma, koje mogu izazvati spolnu nasljednu bolest, nisu zabilježene. U tom je pogledu dijagnostika preferentizacije još nepotpunija od PGD-a u kojoj se može ispitati cijeli genom embrija u fazi blastule.

Međutim, čak i sa negativnim PGD-om, ne može se isključiti da postoje genske oštećenja u genomu embrija koja mogu uzrokovati neželjeni razvoj i eventualna oštećenja nakon rođenja. FISH test može se ikada odnositi samo na odabrane kromosome i gene.