Od ELISA test je medicinski laboratorijski pregled koji rezultira takozvanom reakcijom antigen-antitijelo. Mogu se ispitati različiti antigeni koji igraju ulogu u humanoj ili veterinarskoj medicini. U Njemačkoj su za provođenje ispitivanja dobili samo ovlašteni laboratorijski zavodi.
Što je postupak?
ELISA je kratica za Enzimski test imuno sorbenta, To je, dakle, naziv na engleskom jeziku, ali se uspostavio u njemačkoj medicinskoj upotrebi.
ELISA test jedna je od takozvanih imunoloških metoda unutar medicinskih laboratorijskih ispitivanja. Postupak ispitivanja može se koristiti za otkrivanje molekula proteina u velikom broju tjelesnih tekućina. Otkrivanje ovih molekula omogućava zauzvrat donošenje zaključaka o određenim bolestima ili kliničkim slikama, zbog čega liječnici također postavljaju svoju dijagnozu ovisno o rezultatu takvog ELISA testa. Postupak ispitivanja stoga je vrlo važan u svakodnevnoj kliničkoj praksi, ambulantnom ili bolničkom.
Odgovarajuće tjelesne tekućine, na primjer cjelovita krv ili tekućina iz zglobova, šalju se izravno u laboratorij nakon što su uzete od pacijenta. Uzorci su obično vrlo hitni, jer se izvorni materijal smatra osjetljivim i treba ga ispitati što je prije moguće. Takozvani prekriveni uzorci mogu dovesti do lažno negativnih rezultata, jer su patološki proteini koje je potrebno detektirati u međuvremenu smanjeni ili potpuno razgrađeni. Takozvana pre-analiza igra važnu ulogu u ELISA-i, ako postoje klinički simptomi, sumnjivi ili negativni rezultati trebaju se ponovno ponoviti.
Funkcija, učinak i ciljevi
Epruvete i takozvane mikrotitarske pločice su neophodne za ispravno ispitivanje u akreditiranom medicinskom laboratoriju. Ove pločice s finim, polu-konkavnim urezima izrađene su od posebne plastike i svaka je obložena vrlo specifičnim antitijelom.
Ako je antigen koji se otkriva prisutan u tjelesnoj tekućini koju treba ispitivati, dolazi do specifične reakcije antigen-antitijelo prema takozvanom principu zaključavanja i ključa. Osoblje laboratorija može unositi uzorke materijala u pločice bilo ručno, koristeći pipete, ili potpuno automatski. U suvremenim medicinskim laboratorijskim institutima koriste se potpuno automatizirani sustavi za provođenje ELISA dijagnostike.
Međutim, njih mora nadgledati obučeno osoblje, medicinsko-tehnički laboratorijski pomoćnici. Takozvana unutarnja i vanjska kontrola kvalitete također je odgovornost laboratorijskog osoblja, nadređenog medicinskom osoblju za laboratorijsku medicinu, epidemiologiju infekcije i mikrobiologiju. Nakon prvog pokušaja, tj. Nakon što je materijal pipetiran na ploče, specifični antigeni u uzorku, ako ih ima, već su se vezali za antitijela na plastičnoj ploči.
Nakon toga slijedi ciklus ispiranja fiziološkom fiziološkom otopinom kako bi se iz šarže uklonili ometajući faktori kao što su neželjeni antigeni ili proteini. Ovaj je korak vrlo važan kako bi se izbjegle lažne pozitivne reakcije. Pretpostavljeni pozitivni rezultat koji je laboratorij pogrešno protumačio može u određenim okolnostima imati kobne posljedice za pacijenta. U drugom koraku ispitivanja dodaje se daljnje antitijelo, koje je povezano s enzimom. Ovo obilježeno antitijelo se također veže na antigen.
U trećem i posljednjem koraku dodaje se posebno bojilo u određenoj količini, koje se u većoj ili manjoj mjeri rastavlja na preostale enzimske ostatke. Može se razgraditi samo taj enzim koji prethodno nije vezan za antigen zajedno s antitijelom. Besplatni enzim može cijepati dodanu boju. Točna količina podijeljenog bojila može se odrediti daljnjom medicinskom laboratorijskom metodom, takozvanom fotometrijom. To omogućava da se izvuče točan zaključak da li i koliko antigena postoji u uzorku materijala.
ELISA test se ne koristi samo za početnu dijagnozu ili za potkrijepljivanje sumnjivih dijagnoza na određenim bolestima i kliničkim slikama, već i za praćenje njihovog napretka. Ako koncentracija antigena u testu postane niža tijekom terapije, terapija se smatra uspješnom.
Ovdje možete pronaći svoje lijekove
➔ Lijekovi za jačanje obrambenog i imunološkog sustavaRizici, nuspojave i opasnosti
ELISA test je posebno informativan kroz otkrivanje antigenih struktura u tjelesnim tekućinama. Test omogućava takozvanu kvalitativnu, ali i polukvalitativnu i kvantitativnu izjavu o sumnji na prisutnost određenih antigena u tjelesnim tekućinama.
Za ispitivanje se ne može koristiti sva krv, već samo krvni serum. Izravni test na pacijentu, na primjer, iz kapilarne krvi prsta,, kao što je to slučaj s nekim drugim serološkim testovima, do danas nije moguće. U humanoj medicini, test ELISA koristi se prvenstveno za otkrivanje antigena u bakterijskim, virusnim ili gljivičnim infekcijama. Pored toga, svi pozitivni rezultati serologije za hepatitis ponovo se provjeravaju ELISA testom kao standardom.
Određeni hormoni, poput hormona trudnoće HCG, također se mogu odrediti testom ELISA. Ako se tijekom trudnoće pojave određene komplikacije, precizno poznavanje koncentracije hormona trudnoće u krvi vrlo je korisno dijagnostički i terapijski. Drugo područje indikacije za test je otkrivanje takozvanih paraproteina u mokraći, kao što su, na primjer, kod raznih tumorskih bolesti poput multiplog mijeloma.
ELISA test i danas se provodi u mnogim laboratorijskim institutima, ali stručnjaci smatraju zastarjelim. Enzimski povezana imunološka reakcija u ELISA ispitivanju posljednjih se godina sve više zamjenjuje radioaktivno označenim antitijelima koja daju još bolje kvantitativne rezultate. Ovi testovi su također poznati kao RIA, Radio Immunoabsorbent Test. Daljnji specifični daljnji razvoj ELISA metode su svjetlosno-kemijske metode poput luminiscencije ili fluorescencije.
